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人感染猪链球菌的病原学诊断

【来源:人感染猪链球菌的病原学诊断 发布日期:2007-07-10 15:28:52  |   阅读次数:次   】     【选择字号:
一、标本采集  
    1. 血液 
    在病人入院后用药前,采集静脉血6-8ml,直接滴3-5滴于血平板,同时将3-5ml血注入到血培养瓶增菌,留3ml注入到无菌采血管内分离血清,血凝块不要丢弃,应放冰箱暂存,以备检查急性期抗体和抗原。在病人病后2周采集第2次血液注入无菌采血管分离血清,以备检查病人恢复期抗体。  
    2. 脑脊液 
    疑似脑膜炎型病例应抽取脑脊液(CSF)做细菌培养。取患者CSF2-3ml,注入无菌试管内,3000转/分离心20分钟,用无菌吸管取沉淀物直接接种于新鲜血平板做细菌培养。CSF沉淀物还可做涂片,作革兰氏染色镜检。CSF离心后的上清液置低温冰箱保存,以备检查抗原。 
    二、分离培养 
    将直接接种标本的血平板,于普通培养箱和5%CO2浓度二氧化碳培养箱中36℃培养24h。 
    将接种标本的血培养瓶,于普通培养箱中36℃培养24h。用无菌接种环挑取菌液,划线接种于血平板,于普通培养箱和5%CO2二氧化碳培养箱中36℃培养24h。  
    初步鉴定  结合菌落形态、生长特性、镜下形态分析判断  
    1、菌落形态:猪链球菌在普通培养箱和5%CO2浓度二氧化碳培养箱均能生长,在新鲜血平板上,37℃培养24小时,其菌落直径约1mm,表面突起,光滑湿润、圆整,半透明略带灰白色,菌落周围有轻微溶血环,对着光源从平板背面较易观察。随着培养时间延长,菌落增大,可逐渐变为不透明,溶血现象更明显。     
    2、猪链球菌在普通琼脂平板上生长很差,在新鲜血平板上生长良好,在巧克力平板上生长状况不及血平板。增菌培养可用5%兔血清肉汤或其他营养丰富的肉汤,在商品化的血培养瓶中生长良好。5%CO2培养有助于其生长,但非必需。 
    3、涂片镜检:猪链球菌属于链球菌属,为革兰氏阳性球菌,大小0.8-1um,革兰氏染色结果有时不稳定,在固体培养基中常成双或成单排列,链状较短或少见,液体培养液中可形成长链。 
    三、生化鉴定